Top 5 kết quả sai lệch trên công thức máu (CBC) ở chó & mèo mà bác sĩ thú y cần lưu ý
Công thức máu toàn phần (Complete Blood Count – CBC) là xét nghiệm cơ bản, có giá trị trong chẩn đoán, theo dõi và quản lý điều trị bệnh trên chó và mèo. Tuy nhiên, bên cạnh những thông tin quan trọng, kết quả CBC có thể bị ảnh hưởng bởi nhiều yếu tố kỹ thuật và sinh học, dẫn đến sai số. Những sai số này nếu không được nhận diện có thể dẫn đến diễn giải sai lầm, chẩn đoán nhầm và chỉ định điều trị không phù hợp. Bài viết này trình bày chi tiết 5 kết quả sai lệch thường gặp nhất trong CBC ở chó và mèo, bao gồm: giả giảm tiểu cầu, MCHC tăng giả, số lượng bạch cầu tăng giả, sai số hematocrit tính toán do ngưng kết, và protein huyết tương tăng giả.
Trong thú y, xét nghiệm CBC được sử dụng rộng rãi nhằm:
Tầm soát sức khỏe định kỳ,
Xác định nguyên nhân của các triệu chứng lâm sàng,
Hỗ trợ xây dựng chẩn đoán phân biệt,
Theo dõi tiến triển bệnh và đáp ứng điều trị.
Mặc dù máy huyết học hiện đại mang lại kết quả nhanh chóng và đáng tin cậy, các yếu tố liên quan đến thao tác lấy mẫu, đặc điểm sinh học của máu và hạn chế kỹ thuật phân tích có thể dẫn đến sai số. Những sai số này thường biểu hiện dưới dạng kết quả bất thường nhưng không tương thích với biểu hiện lâm sàng, gây khó khăn cho bác sĩ thú y.
Dưới đây là 5 loại sai số thường gặp và có ý nghĩa lâm sàng lớn trong CBC ở chó và mèo.
1. Giả giảm tiểu cầu do tiểu cầu vón cục
Tiểu cầu đóng vai trò quan trọng trong cầm máu và đông máu. Khi lấy máu không đúng kỹ thuật – ví dụ chọc ven nhiều lần, thao tác không sạch, hoặc trộn ống không đều – tiểu cầu dễ bị kích hoạt và kết dính lại thành cụm. Hiện tượng này phổ biến hơn ở mèo so với chó.
Sai số
Máy huyết học tự động phân biệt tế bào dựa trên kích thước hoặc đặc tính tán xạ ánh sáng. Các cụm tiểu cầu quá lớn sẽ không được đếm chính xác, dẫn đến báo cáo kết quả giảm tiểu cầu giả (pseudothrombocytopenia).
HÌNH 1 Các cụm tiểu cầu lớn (mũi tên liền) trong một mẫu máu từ chó. Các cục máu đông vi thể hoặc cụm tiểu cầu liên quan đến sự kết tập tiểu cầu quá mức có thể dẫn đến giảm tiểu cầu giả (pseudothrombocytopenia). Cũng có thể thấy các tiểu cầu riêng lẻ (mũi tên đứt đoạn), một hồng cầu trưởng thành (ô, bên trái) và một bạch cầu đa sắc (ô, bên phải).
Ý nghĩa lâm sàng
Nếu không nhận diện, bác sĩ có thể chẩn đoán nhầm thành giảm tiểu cầu thực sự, dẫn đến lo ngại bệnh lý xuất huyết hoặc các hội chứng miễn dịch.
Khắc phục
Nếu có sai số, cần lấy lại mẫu máu với kỹ thuật nhẹ nhàng, dòng máu chảy ổn định, và trộn ngay sau khi lấy.
Luôn soi kính hiển vi lam máu để xác nhận kết quả.
Quan sát trực tiếp trong ống EDTA nhằm phát hiện cục máu đông.
HÌNH 2 Cục máu đông (mũi tên) trong ống EDTA. Khuyến nghị quan sát bằng mắt thường để kiểm tra cục máu đông lớn trước khi tiến hành phân tích.
2. MCHC tăng giả do tan máu hoặc máu mỡ
MCHC (Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration) là chỉ số phản ánh nồng độ hemoglobin trung bình trong mỗi hồng cầu. Trong máy huyết học, chỉ có ba giá trị được đo trực tiếp:
Thể tích hồng cầu trung bình MCV
Nồng độ hemoglobin [Hgb]
Số lượng hồng cầu [RBC]
Từ đó, máy sẽ tính toán ra:
Hematocrit (Hct): cHct = (MCV × [RBC]) / 10
MCHC: MCHC = ([Hgb] × 100) / cHct
Điều này có nghĩa: nếu giá trị đo trực tiếp bị nhiễu → các chỉ số tính toán (như Hct và MCHC) cũng sai lệch.
Nguyên nhân gây tăng giả MCHC
Tan máu (hemolysis)
Trong lòng mạch (bệnh lý): hemoglobin tự do trong huyết tương được máy tính gộp chung với hemoglobin trong hồng cầu → làm [Hgb] tăng giả so với Hct, dẫn đến MCHC tăng giả.
Tan máu ngoài cơ thể (in vitro): khi lấy máu hoặc xử lý mẫu không đúng, hồng cầu vỡ làm Hct và [RBC] giảm giả, trong khi [Hgb] vẫn phản ánh đúng. Kết quả cuối cùng vẫn là MCHC tăng giả.
Máu mỡ (lipemia)
Huyết tương lipemic chứa nhiều hạt lipid → gây đục huyết tương và cản trở phép đo quang học.
Máy phân tích có thể nhầm lẫn lipid với hemoglobin, làm [Hgb] tăng giả → MCHC tăng giả.
Trường hợp này thường thấy ở thú không nhịn ăn trước khi lấy máu (Hình 3).
Ý nghĩa lâm sàng
MCHC tăng cao bất thường thường không phản ánh bệnh lý thật sự, vì hồng cầu có giới hạn sinh học về lượng hemoglobin chứa được.
Nếu không nhận diện được sai số, bác sĩ thú y có thể chẩn đoán nhầm thành bệnh lý huyết học nặng.
HÌNH 3 Máu bị lipemic từ một con chó không nhịn ăn. Mẫu này được bảo quản lạnh qua đêm, cho phép hồng cầu (RBCs) lắng xuống và do đó làm nổi bật tính chất lipemic của huyết tương (mũi tên). Độ đục tăng lên gây ra nhiễu trong các xét nghiệm huyết học dựa vào tán xạ ánh sáng (ví dụ: protein toàn phần huyết tương đo bằng khúc xạ kế).
Khắc phục
Giảm tan máu bằng cách:
Chọc ven nhẹ nhàng, hạn chế chấn thương mạch máu
Xử lý mẫu cẩn thận, tránh lắc mạnh ống máu
Phân tích mẫu càng sớm càng tốt. Nếu cần bảo quản, có thể giữ mẫu EDTA trong tủ lạnh và phân tích trong vòng 24 giờ.
Khi có thể, nên lấy máu lúc thú nhịn ăn để giảm lipemia.
Quan sát màu huyết tương sau ly tâm:
Đỏ → tan máu
Trắng đục → máu mỡ
Luôn diễn giải kết quả MCHC kết hợp với lam máu và dữ liệu lâm sàng.
3. Số lượng bạch cầu tăng giả do hồng cầu có nhân (nRBCs)
Cơ chế sai số
Máy huyết học tự động thường phân biệt tế bào dựa trên:
Trở kháng điện (kích thước tế bào) hoặc
Đặc tính tán xạ ánh sáng
Tuy nhiên, hồng cầu có nhân (nucleated red blood cells – nRBCs), bao gồm các dạng hồng cầu chưa trưởng thành (rubricytes, metarubricytes), vẫn còn mang nhân trong quá trình phát triển. Máy phân tích không thể phân biệt nRBCs với bạch cầu, vì cả hai đều là tế bào có nhân. Do đó, nRBCs bị đếm nhầm thành bạch cầu, dẫn đến kết quả WBC (bạch cầu tổng) tăng giả.
Ý nghĩa lâm sàng
Nếu không phát hiện sai số, bác sĩ thú y có thể chẩn đoán nhầm tăng bạch cầu (leukocytosis), từ đó đánh giá sai tình trạng viêm, nhiễm trùng hoặc rối loạn tủy xương.
Do đó, việc xác định sự hiện diện của nRBCs là rất quan trọng khi diễn giải kết quả CBC.
Khi nào cần hiệu chỉnh?
Trong quá trình đếm vi sai thủ công trên lam máu:
Nếu số lượng nRBCs > 5 trên 100 bạch cầu, thì WBC đo bằng máy tự động cần được hiệu chỉnh.
Ngưỡng chấp nhận có thể thay đổi một chút giữa các phòng xét nghiệm tham chiếu.
Khắc phục
Luôn soi lam máu song song với kết quả máy.
Thực hiện công thức bạch cầu bằng tay để xác nhận.
Áp dụng công thức hiệu chỉnh WBC thực sự dựa trên số lượng nRBCs quan sát được.
Như vậy, việc hiệu chỉnh WBC khi có nhiều nRBCs giúp bác sĩ thú y tránh chẩn đoán nhầm tình trạng tăng bạch cầu, đảm bảo kết quả CBC phản ánh chính xác hơn tình trạng huyết học của thú bệnh.
4. Sai số hematocrit tính toán do ngưng kết
Hematocrit được xác định như thế nào?
PCV (Packed Cell Volume): đo trực tiếp bằng phương pháp quay ly tâm microhematocrit.
Hct tính toán: máy huyết học tính dựa trên số lượng hồng cầu (RBC) và thể tích hồng cầu trung bình (MCV).
Ở thú khỏe mạnh và mẫu được xử lý đúng, PCV và Hct tính toán thường chênh lệch <3%. Nếu chênh lệch >3%, gọi là “Hct mismatch”, và được coi là có ý nghĩa lâm sàng.
Nguyên nhân gây Hct mismatch
Một số yếu tố có thể gây chênh lệch PCV – Hct, bao gồm:
Ống EDTA chứa quá nhiều chất chống đông so với lượng máu
Mẫu máu trộn không đều
Rối loạn điện giải (giảm/hypernatremia rõ rệt)
Ngưng kết hồng cầu (agglutination)
Trong phạm vi này, chúng ta tập trung vào ngưng kết hồng cầu.
Ngưng kết hồng cầu (Agglutination)
Là hiện tượng hồng cầu kết tụ dạng “chùm nho” do kháng thể, thường gặp nhất trong thiếu máu tan máu miễn dịch (IMHA).
IgM là kháng thể có nhiều vị trí gắn kết, dễ tạo thành các khối hồng cầu kết dính.
Khi đi qua máy huyết học:
Các cụm hồng cầu có thể bị đếm nhầm thành một hồng cầu lớn → MCV tăng giả
Hoặc không được đếm nếu khối quá lớn → RBC giảm giả
Kết quả là Hct tính toán sai lệch: có thể tăng hoặc giảm tùy theo sự thay đổi MCV và RBC. Trong khi đó, PCV quay ly tâm phản ánh chính xác hơn ở các trường hợp này.
HÌNH 4 Minh họa sơ đồ hiện tượng ngưng kết hồng cầu (mũi tên liền) qua pentamer immunoglobulin M so với hiện tượng chuỗi đồng xu (rouleaux, mũi tên đứt). Cụm hồng cầu được khoanh tròn có thể bị đếm như một hồng cầu lớn hoặc không được đếm.
Phân biệt ngưng kết với xếp đồng tiền (rouleaux)
Rouleaux: hồng cầu xếp chồng giống chuỗi đồng xu, thường liên quan đến viêm, nhưng không gây sai số Hct tính toán.
Ngưng kết: hồng cầu dính kết chặt thành cụm bất thường.
Trên lam máu, không phải lúc nào cũng dễ phân biệt.
Khi nghi ngờ, có thể làm test pha loãng với NaCl:
Trộn 1 giọt máu với 4–9 giọt nước muối → soi lam ướt.
Nếu hồng cầu tách rời → rouleaux.
Nếu vẫn dính thành cụm → ngưng kết.
Khắc phục
Luôn soi lam máu để đánh giá hiện tượng hồng cầu.
Đảm bảo trộn mẫu đủ trước khi đo PCV.
Khi có ngưng kết, sử dụng PCV (quay ly tâm) thay cho Hct tính toán.
Thực hiện test phân tán với NaCl để phân biệt ngưng kết thật sự và rouleaux.
5. Tổng protein huyết tương tăng giả do máu mỡ
Trong hầu hết các phòng xét nghiệm, tổng protein huyết tương thường được đo bằng khúc xạ kế như một phần của xét nghiệm CBC. Quy trình gồm:
Lấy máu toàn phần EDTA → cho vào ống mao quản → ly tâm ở tốc độ cao (~13.000 × g) để tách các tế bào.
Sau ly tâm, lớp huyết tương được lấy ra (bằng cách đẩy trực tiếp hoặc bẻ ống trên lớp buffy coat).
Một giọt huyết tương được đặt lên khúc xạ kế để đo.
Khúc xạ kế hoạt động dựa trên đặc tính khúc xạ ánh sáng của huyết tương, giả định rằng phần lớn chất hòa tan là protein. Tuy nhiên, khi mẫu máu bị lipemic (máu mỡ), các hạt lipid làm thay đổi đường truyền ánh sáng, khiến kết quả đo bị sai lệch. Điều này dẫn đến tăng giả nồng độ protein huyết tương so với thực tế.
Khắc phục
Khuyến khích cho thú nhịn ăn trước khi lấy máu để hạn chế lipemia.
Nếu phải lấy mẫu từ thú không nhịn ăn, cần giải thích kết quả cẩn trọng, kết hợp thêm với các chỉ số sinh hóa khác trước khi đưa ra chẩn đoán.
Kết luận
Sai số trong CBC là thách thức thường gặp đối với bác sĩ thú y. Nhận diện kịp thời và áp dụng các biện pháp khắc phục giúp:
Tránh chẩn đoán nhầm
Đảm bảo quyết định điều trị chính xác
Nâng cao độ tin cậy của xét nghiệm huyết học
Trả lời: CBC luôn cần được đánh giá song song với lam máu, dữ liệu lâm sàng và tiền sử bệnh để đảm bảo tính chính xác.
FAQs – Câu hỏi thường gặp
1. CBC trong thú y thường được chỉ định khi nào? Trả lời: Trong khám định kỳ, khi có triệu chứng bệnh, và để theo dõi đáp ứng điều trị.
2. Có cần nhịn ăn trước khi làm xét nghiệm CBC? Trả lời: Nên nhịn ăn 8–12 giờ để hạn chế lipemia.
3. Máy huyết học tự động có thể thay thế soi lam máu không? Trả lời: Không. Lam máu vẫn cần thiết để loại trừ sai số và quan sát hình thái tế bào.
4. Nguyên nhân phổ biến nhất gây sai số CBC là gì? Trả lời: Do thao tác lấy mẫu không đúng kỹ thuật và đặc điểm sinh học của mẫu máu.
5. Sai số CBC có thể dẫn đến điều trị sai không? Trả lời: Có. Nếu không nhận diện sai số, dễ dẫn đến chỉ định điều trị không phù hợp.
Tham khảo & Tài liệu đọc thêm
Scott MA, Stockham SL. Platelets. In: Scott MA, Stockham SL. Fundamentals of Veterinary Clinical Pathology. 2nd ed. Blackwell Publishing; 2008:223‑257.
Wasserkrug‑Naor A. Platelet kinetics and laboratory evaluation of thrombocytopenia. In: Brooks MB, Harr KE, Seelig DM, Wardrop KJ, Weiss DJ, eds. Schalm’s Veterinary Hematology. 7th ed. Wiley Blackwell; 2021:675‑685.
Weiser G. Laboratory technology for veterinary medicine. In: Thrall MA, Weiser G, Allison RW, Campbell TW, eds. Veterinary Hematology, Clinical Chemistry, and Cytology. 3rd ed. Wiley‑Blackwell; 2022:3‑29.
Norman EJ, Barron RC, Nash AS, Clampitt RB. Prevalence of low automated platelet counts in cats: comparison with prevalence of thrombocytopenia based on blood smear estimation. Vet Clin Pathol. 2001;30(3):137‑140. doi:10.1111/j.1939‑165x.2001.tb00422.x
Harvey JW. Hematology procedures. In: Harvey JW. Veterinary Hematology: A Diagnostic Guide and Color Atlas. Elsevier Saunders; 2012:11‑32.
Scott MA, Stockham SL. Hemostasis. In: Scott MA, Stockham SL. Fundamentals of Veterinary Clinical Pathology. 2nd ed. Blackwell Publishing; 2008:259‑321.
Scott MA, Stockham SL. Erythrocytes. In: Scott MA, Stockham SL. Fundamentals of Veterinary Clinical Pathology. 2nd ed. Blackwell Publishing; 2008:107‑221.
Harvey JW. Evaluation of erythrocytes. In: Harvey JW. Veterinary Hematology: A Diagnostic Guide and Color Atlas. Elsevier Saunders; 2012:49‑121.
Thrall MA. Classification of and diagnostic approach to anemia. In: Thrall MA, Weiser G, Allison RW, Campbell TW, eds. Veterinary Hematology, Clinical Chemistry, and Cytology. 3rd ed. Wiley‑Blackwell; 2022:100‑105.
Zeng SG, Zeng TT, Jiang H, et al. A simple, fast correction method of triglyceride interference in blood hemoglobin automated measurement. J Clin Lab Anal. 2013;27(5):341‑345. doi:10.1002/jcla.21568
Stirn M, Freeman KP. Quality management of hematology techniques. In: Brooks MB, Harr KE, Seelig DM, Wardrop KJ, Weiss DJ, eds. Schalm’s Veterinary Hematology. 7th ed. Wiley Blackwell; 2021:1243‑1254.
Harvey JW. Hematopoiesis. In: Harvey JW. Veterinary Hematology: A Diagnostic Guide and Color Atlas. Elsevier Saunders; 2012:33‑48.
Newman AW, Behling‑Kelly E. Quality assurance and quality control in point‑of‑care testing. Top Companion Anim Med. 2016;31(1):2‑10. doi:10.1053/j.tcam.2016.05.003
Scott MA, Stockham SL. Proteins. In: Scott MA, Stockham SL. Fundamentals of Veterinary Clinical Pathology. 2nd ed. Blackwell Publishing; 2008:369‑413.
Tác giả tham khảo
Chanel Shum, BVSc – Thực tập sinh y học chẩn đoán tại Đại học Bang Kansas. Tốt nghiệp BVSc tại Đại học Massey, Palmerston North, New Zealand, cô dự định theo đuổi chương trình nội trú về bệnh lý lâm sàng với các quan tâm đặc biệt trong hoá sinh lâm sàng, tế bào học và các quy trình bảo đảm và kiểm soát chất lượng.
Lisa M. Pohlman, DVM, MS, DACVP – Giáo sư bộ môn bệnh lý lâm sàng tại Đại học Bang Kansas. Bà nhận bằng DVM từ Đại học Guelph (Ontario, Canada) và bằng MS về bệnh lý lâm sàng từ Đại học Auburn, nơi bà cũng hoàn thành nội trú. Bà là giảng viên và người hướng dẫn tích cực cho sinh viên thú y, từng nhận nhiều giải thưởng giảng dạy, trong đó có Giải thưởng Nhà giáo của Hiệp hội Bệnh lý Lâm sàng Thú y Hoa Kỳ và Giải thưởng Nhà giáo xuất sắc của Zoetis. Bà cũng tham gia giảng dạy liên tục thông qua các bài giảng, khóa học trực tuyến và ấn phẩm. Ngoài ra, bà là chủ tịch kiêm giám đốc y khoa của Hiệp hội Nhân đạo Quận Riley tại Manhattan, Kansas. Các lĩnh vực nghiên cứu của bà bao gồm cải tiến phương pháp xét nghiệm bệnh lý lâm sàng và nhận diện, mô tả bệnh ở động vật nuôi, đặc biệt ở động vật trong trại cứu hộ cũng như thú cưng của những người không đủ khả năng chăm sóc thú y định kỳ.